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Protein preparation from plant tissues

저작시기 2016.10 |등록일 2017.02.02 | 최종수정일 2017.02.02 한글파일한컴오피스 (hwp) | 4페이지 | 가격 1,000원

목차

Ⅰ. Materials

Ⅱ. Methods

Ⅳ. Discussion
1. RNA extraction buffer (β-mercaptoethanol, SDS, Tris-HCl, EDTA)
2. PCI (Phenol: Chloroform: Isoamyl Alcohol = 25: 24: 1)
3. Acetone precipitation
4. Sample loading buffer (Tris-HCl pH 6.8, SDS, Clycerol, β-mercaptoethanol, Bromophenol blue)
5. 단백질 열처리 이유

Ⅴ. Reference

본문내용

Ⅰ. Materials
바이러스 감염 식물체, 1.5ml microcentrifuge tubes, PCI, RNA extraction buffer, pestle, microcentrifuge, 100% acetone, vacuum drier, 1X sample loading buffer, heat block, pipette tip, latex gloves etc.

Ⅱ. Methods
Protein preparation
1. 식물체의 잎을 2~3장 추출한 후 pestle을 이용해 갈아주다가, 300ul의 RNA extraction
buffer를 넣고 다시 곱게 갈아준다.
2. 찌꺼기가 없을 때가지 갈아준 후 동량(300ul)의 PCI를 넣고 inverting 해준다.
3. 12000rpm, room temperature에서 5분간 원심 분리한다.
4. 상층액과 하층액을 전부 제거하여준다.
5. 중간층의 pellet만 남으면 100% acetone을 1ml 넣어준 후 vortexing하여 잘 풀어준다.

참고 자료

남상욱 외 2인, 유전공학의 이해 제 2판, p190
http://www.ibric.org/myboard/read.php?id=194365&Board=exp_qna
http://terms.naver.com/entry.nhn?docId=2313357&cid=42419&categoryId=42419
http://www.ibric.org/myboard/read.php?id=120589&Board=exp_qna
http://www.nhm.ac.uk/content/dam/nhmwww/our-science/dpts-facilities-staff/Coreresear
chlabs/phenol-chloroform.pdf
http://niki-nowhere.tistory.com/283
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