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[실험프로토콜] FACS sample 제조 (방법2)

저작시기 2017.01 |등록일 2017.01.03 파일확장자어도비 PDF (pdf) | 62페이지 | 가격 3,000원

* 본 문서는 배포용으로 복사 및 편집이 불가합니다.

소개글

PI 염색하여 FACS sample을 만드는 방법입니다.
앞서 올린 방법1과 약간 다른 방법입니다.
그림을 통하여 쉽게 설명하였으니 처음하는 사람도 쉽게 할 수 있습니다.

목차

1. Method
2. Materials
3. Using Materials (machine & accessory)

본문내용

Method
First Day
1. Cell culture. (6well)
- 1Day키운 후 PACS 찍을 경우 cell양 : 1X105
- 4Day 키운 후 PACS 찍을 경우 cell양 : 0.2X105
- Cell의 양은 처리해주는 약물 or virus에 따라서 다름.
2. 37℃, CO2 incubation overnight.

Next Day
1. 배지 먼저 falcon tube에 옮기기. (Washing한 PBS도 모음.)
2. 붙어있는 cell은 trypsin으로 떼서 pipetting으로 cell을 잘 풀어주고 centrifuge down.
3. 1XPBS로 washing. (3000rpm 1-2min정도)
4. Ice에 담아 washing (3000rpm)으로 pellet suspension.
- 이때 pipetting, vortexing하여 single cell로 잘 풀어줘야 함. (잘 안풀리는 cell : PBS 285㎕ + FBS 15㎕(final 5% FBS)로 cell pellet suspension)

참고 자료

없음
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