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전기영동 실험

저작시기 2014.03 |등록일 2014.10.06 한글파일한글 (hwp) | 7페이지 | 가격 1,500원

목차

1. Title
2. Date
3. Name
4. Purpose
5. Materials
6. Methods
7. Results
8. Discussion
9. Projects
10. Reference

본문내용

1. Title : Agarose gel 만들기 및 DNA electrophoresis
2. Date : 2012년 11월 23일
3. Name
4. Purpose : 전기영동의 의미를 이해하고 DNA의 크기 및 구조에 따른 결과차이를 이해한다. Agarose gel에 DNA와 loading dye를 넣고 전기를 걸어주면 DNA는 인산기 때문에 매질을 타고 양전하 방향으로 움직이게 된다. 이때 움직이는 속도는 DNA의 크기에 다라 다르므로 매질 내에서 종류에 따라 분리하게 되며 전기영동은 DNA의 크기에 따른 분리를 한다.
4. Materials : PCR product ,6X dye, TAE buffer, micro pipette, tip, tank, agarose, EtBr, steriler, magnetic bar, 플라스크, DW, 1X TAE buffer, size marker.
5. Methods
< Agarose gel 만들기 >
① 1× TAE 용액으로 희석하여 350㎖에 3.5g을 섞어서 1%로 만든다.
② 전자레인지를 사용하여 열을 가해서 완전 용해 시킨다.(or magnetic bar와 steriler를 이용하여 녹인다.)
③ 뜨거운 것을 약간 식힌 후 틀에 부어준다.
④ 바를 끼워준다.
⑤ 완전하게 굳으면 틀에서 떼어내고 1× TAE 용액에 담궈 보관한다.

① well의 가장 왼편에 loading dye와 DNA를 섞어서 주입한다. 몇 람다를 넣어야 할까요? (총 양은 6㎕이고 loading dye는 6X입니다)
② 전기를 50mV-100mV를 걸어준 후 15분 정도 기다린다.
③ DNA를 확인한다.

※ DNA loading dye
Agarose의 well에 DNA를 넣어줄 때 DNA를 무겁게 하여 agarose의 홈으로
이동하여 하며 푸른빛을 띠면서 DNA가 전기영동 된 정도를 알 수 있다.
ⓐ DNA 분자의 크기가 클수록 느리게 이동한다.
ⓑ Agarose의 농도가 높을수록 느리게 이동한다.
ⓒ DNA의 구조에 따라 이동속도가 다르다.
ⓓ 부하되는 전압이 놓을수록 이동속도가 다르다.

참고 자료

김을상, 최신생화학, 신광문화사
제임스D,왓슨(1997), DNA : 생명의 비밀
오계헌 외 역(2006), Brock의 미생물학, 월드사이언스
정승태(2000), DNA칩, Biotechnology Web Magazine 8월호, 생명공학연구원 BIOLOGY 8edition CAMPBELL405p~408p
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