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[예비]PCR

저작시기 1997.01 |등록일 2011.03.04 한글파일한글 (hwp) | 3페이지 | 가격 1,000원

소개글

이론 및 실험방법

목차

없음

본문내용

1.실험제목 : PCR (Polymerase Chain Reaction)
2.실험일자 : 2010년 3월 26일
3.실험목적 : 적은양의 DNA를 대양으로 증폭하는 PCR방법을 이용하여 범죄자의 증거자료 또는 병의 진단 등을 하여 본다.
4.실험원리
① PCR : 중합효소 연쇄반응(polymerase chain reaction, PCR)은 특정 DNA 부위를 특이적으로 반복 합성하여 시험관내에서 원하는 DNA 분자를 증폭시키는 방법으로서, 아주 적은 양의 DNA를 이용하여 많은 양의 DNA 합성이 가능하므로 분자 생물학적으로 제한효소의 발견만큼 획기적인 것이라고 할 수 있다. 즉 genomic DNA와 같은 아주 큰 DNA로부터 원하는 DNA 부분만을 선택적으로 증폭시킨 후 일반적으로 사용되는 agarose gel이나 polyacrylamide gel 상에서 뚜렷하게 보이는 band로 가시화할 수가 있다.
중합효소 연쇄반응을 통하여 in vitro상에서 특정 부위의 DNA를 105∼108배까지 수 시간 내에 증폭시킬 수 있으며, 이렇게 증폭된 DNA를 여러 가지 실험에 이용할 수 있고, 실험 결과를 토대로 여러 의학적인 연구에 응용할 수가 있다.
② Template DNA : 선택하여 증폭하고자 하는 target DNA 단편을 가리키는 용어로서 세포내의 chromosomal DNA나 전염성 병원체의 DNA 또는 RNA로부터 제조한 complementary DNA(cDNA), plasmid DNA 등을 쓸 수 있다. 불순물이 섞여 있으면 반응을 억제할 수 있으므로 가능한 한 정제하여 사용하는 것이 좋으며, 정제가 안 된 경우에는 양이 적을 때 반응이 충분히 일어나지 않고 양이 많으면 비특이적 반응이 일어나므로 주의해야 한다.
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