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전기영동원리와 전기영동 종류

저작시기 2010.06 | 등록일 2010.06.28 한글파일 한컴오피스 (hwp) | 5페이지 | 가격 1,000원

소개글

전기영동의 원리와 전기영동의 종류에 대해 조사한 레포트입니다.
필요하신 분들은 유용하게 쓰셨으면 좋겠습니다.

목차

1. 실험목적
2. 실험기구
3. 실험방법
1) DNA 추출
2) 전기영동 방법
4. 관련이론
ꊱ 전기영동의 원리
ꊲ Polyacrylamide 젤 전기영동
ꊳ 전기영동의 종류
ⓛ DNA의 겔 전기영동
② 펄스장겔 전기영동(PFGE)
③ 변성기울기 겔 전기영동(DGGE)
5. 참고문헌

본문내용

1. 실험목적
- 생체조직으로부터 추출한 단백질을 Polyacrylamid Gal Electrophoresis(PAGE)를 이용하여 단백질은 분리하고 크기를 측정한다.

2. 실험기구
- 갯기름나물 잎, 막대사발과 막대, 액체질소, 1.5ml tube, DNA mini prep kit, pipet (2, 10, 100, 100㎕), column, cetrifuge, voltexing, hot block, timer, gel plate, agarose, 전기영동장치, 1x TAE buffer 1kb ladder, 6x load dye, EtBr, transilluminator

3. 실험방법
1) DNA 추출
① 약 200㎕의 식물 조직 또는 50㎎의 건조된 조직을 액체 질소를 이용하여 곱게 마쇄하여 깨끗한 1.5ml 튜브로 옮긴다. 가급적이면 녹지 않도록 주의한다.
② 400㎕의 PL buffer와 10㎕ RNase A를 첨가하여 voltex를 이용하여 강하게 섞어준 뒤 65℃에서 15분간 정치시켜 분해하도록 한다. 이 때 간격으로 교반하여 반응이 더욱 잘 되도록 한다.
③ 반응 시간 종료 후, 200㎕의 PP buffer를 첨가하고 강하게 흔든 후, 얼음 속에서 5분간 정치시켜 단백질 침전을 유도한다.
④ 이후, 14000rpm으로 10분간 원심 분리한다. 이때, 새로운 1.5ml 튜브와 컬럼을 준비한다.
⑤ 원심 분리 후, 상층액 300㎕를 새로운 튜브로 옮기고, 1.5배의 PB buffer(450㎕)를 첨가하여 피펫을 이용하여 섞어준다.
⑥ 컬럼에 섞어준 샘플 용액 650㎕를 옮긴 후, 10000rpm으로 30초간 원심 분리하고 컬럼을 빠져나온 용액은 버리고 남은 샘플 용액을 다시 한번 동일한 방법으로 반복한다.

참고 자료

- 응용미생물학실험, 유주현·변유량, 효일, 2007, 226p~
- 일반생물학(7판), Willey sherwood Woolverton, 김영민 외8명, 라이프사이언스, 2008, 350p
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