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(일반화학실험) 크로마토그래피

저작시기 2009.10 |등록일 2010.04.14 한글파일한글 (hwp) | 4페이지 | 가격 500원

소개글

실험목적 : 정상과 역상 크로마토그래피에 의한 색소의 분리를 통하여 크로마토그래피의 원리와 극성의 개념을 배운다.

실험원리 : 크로마토그래피에는 화합물이 고체 표면에 흡착되는 정도의 차이를 이용한 “흡착 크로마토그래피”, 작은 분자가 교대로 결합된 겔의 틈새를 잘 침투하는 효과를 이용하는 “겔투과 크로마토그래피”, 주어진 pH에서 화합물이 해리해서 생긴 이온의 전하 차이를 이용하는 “이온교환 크로마토그래피”와 용매에 녹는 정도가 다른 점을 이용한 “분배 크로마토그래피” 등의 여러 가지 방법이 있다. 석유에터를 혼합한 용액에 분자의 극성이 다른 설탕, 아세트산, 식용유를 넣고 흔들어준 후 두 층으로 갈라지게 하면 극성이 작은 석유에터에 녹아있게 된다.

목차

1. 실험제목
2. 실험날짜
3. 실험 조 및 공동 실험자
4. 실험목적
5. 실험원리
6. 시약 및 기구
7. 실험방법

본문내용

실험 A. 얇은 층 크로마토그래피에 의한 색소의 분리 (정상 크로마토그래피)
1) 적색 40호, 황색 5호, 청색 1호의 묽은 혼합 용액 각각과 4가지의 미지 시료를 모세관에 묻혀서 TLC판의 바닥에서 1 cm 위치에 1 cm 간격으로 일렬로 찍어서 반점을 만들고 말린다.
2) TLC판을 1-뷰탄올:아세트산:물을 60:15:25의 비로 혼합한의 전개제가 담긴 비커에 넣어서 전개를 시작한다. 그림 8-3과 같이 시료의 반점이 전개제에 잠기지 않도록 TLC판을 수직으로 세우고, 전개제가 증발하지 않도록 시계접시를 덮는다.
3) 전개제가 TLC판의 위쪽 끝에서 1 cm 정도 떨어진 곳까지 도달하면 TLC판을 꺼내서 말린 다음에 그림 8-4와 같이 값과 미지 시료의 경우에 생긴 반점들의 값을 비교해서 미지 시료에 들어있는 색소의 종류를 알아낸다.

실험 B. C-18 카트리지를 이용한 색소의 분리 (역상 크로마토그래피)
1) C-18 카트리지를 주사기에 끼우고 노랑, 빨강, 파랑 색소의 혼합 용액 한 방울을 카츠리지 위쪽에 넣은 후 약 3 mL의 물을 주사기에 채우고 서서히 약한 압력을 가한다. 세 가지 색소가 분리되면 이들 색소를 극성이 큰 것부터 작은 것 순서로 나열한다.
2) 카트리지에 결합된 색소를 흘러나오게 하려면 이동상의 극성을 크게 해주어야 한다. 물 분자의 수소 하나가 메틸기로 치환된 메탄올은 물보다 극성이 크다. 주사기 위쪽에 남아있는 물을 버리고, 30% 메탄올 3 mL 정도를 채운 후에 압력을 가하여 흘려주면서 카트리지에 남아있는 색소가 어떻게 움직이는가를 관찰한다. 카트리지를 사용한 후에는 100% 메탄올 3 mL로 카트리지를 씻어내고, 3 mL의 물로 다시 씻어낸 후에 다시 사용한다.
3) 파랑 색소의 묽은 용액 5 mL 정도를 세척한 카트리지에 통과시키면서 색소가 어떻게 되는지, 그리고 나오는 용액의 색깔은 어떻게 바뀌는지 관찰한다.

실험 C. 컬럼 크로마토그래피를 이용한 색소의 분리(정상 크로마토그래피)
1) 그림 8-5와 같이 10 mL주사기를 수직으로 세우고, 긴 유리봉을 이용하여 유리솜으로 아래를 막아 충진제가 빠지지 않도록 한다.
2) 1-부탄올()과 암모니아수(2 M)를 6:2으로 잘 섞어서 분액 깔때기에 넣고 5 분간 잘 흔들어 섞은 후 두 층으로 갈라지게 두었다가 위층의 용액을 용리액으로 사용한다.
3) 용리액을 주사기에 약 3/4 정도 채우고 여기에 알루미나(산화 알루미늄)를 채운다. 이때 알루미나가 골고루 채워지도록 하기 위해 연필로 주사기를 가볍게 톡톡치면서 전체 부피의 약 3/4정도 되도록 채운다.
4) 거름종이를 주사기 안쪽 지름에 맞도록 원형으로 잘라 맨위에 깐다(이때, 항상 고체의 윗 부분까지 용리액이 채워져 있어야 한다).
5) 색소 혼합 용액 두세 방울을 조심스럽게 거름종이 위에 가한다.
6) 용리액을 서서히 흘려주면서 색소가 분리되는것을 관찰한다.
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