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Ion exchange chromatography를 이용한 단백질의 정제

저작시기 2009.12 |등록일 2009.12.23 한글파일한글 (hwp) | 4페이지 | 가격 1,500원

소개글

Ion exchange chromatography를 이용한 단백질의 정제

목차

1. 실험제목
2. 실험목적
3. 실험이론
(1) Ion exchange chromatography
(2)Ion exchange column의 기저(matrix) 및 작용
(3) 등전점 - pl (isoelectric point)
4. 참고문헌

본문내용

1. 실험제목 : Ion exchange chromatography를 이용한 단백질의 정제
2. 실험목적
-Ion exchange chromatography의 원리를 이해하고 혼합된 단백질 시료를 이용하여 단백질을 분리 해 본다.
-pl(isoelectric point) 값의 의미를 이해하고 data base를 이용해 pl 값을 구하 는 방법을 알아본다.
3. 실험이론
(1) Ion exchange chromatography
이온교환수지를 고정상으로 하여 사용하는 크로마토그래피의 한 형식으로, 이온교환수지주(컬럼)의 상단에 시료혼합물을 붙여 적당한 전해질 용액으로 전개하면, 성분이온의 수지에 대한 교환흡착성의 차이에 의해, 각 성분의 흡착대가 다른 속도로 강하하면서 분리하게 된다. 이 전개조작을 용리라 하고 전개제를 용리제라고 한다. 용리를 계속하면 흡착성이 가장 약한 성분에서 먼저 용출하므로, 일정분획(fraction)마다 그 농도를 측정하고, 용출액량에 대해서 플로트하면 용출곡선을 만들 수가 있다. 이것에 의해 아미노산과 같은 물질의 확인이나 정량을 할 수 있다. 흡착성이 비슷한 다가금속이온의 상호분리에는 용리제로서 착형성제를 쓰며, 착물의 해리도 차이를 이용하는 방법이 가장 많이 사용된다. 구연산염이나 EDTA에 의한 란타노이드의 양이온 교환분리나 염산용액에 의한 여러 개의 금속이온의 음이온교환분리 등이 그 전형적인 예라 할 수 있다. 이온교환수지는 교환용량이 크고 반복해서 사용할 수 있으므로 공업적 규모로 대량의 물질의 크로마토그래프적 조작을 할 수 있는 이점이 있다.
이번 실험에서 Ion exchange chromatography를 이용하는 이유 역시 단백질을 구성하는 아미노산의 표면에 전하차이가 존재하기 때문이다. 단백질을 구성하는 아미노산 중 Arginine, histidine, lysine 등의 아미노산 잔기는 중성 pH에서 (+) 전하를 띠고 있고, aspartic acid, glutamic acid 등의 아미노산 잔기는 (-) 전하를 띠고 있다.

참고 자료

생명분자공학실험, 아주대학교, p.29~32
http://blog.naver.com/tsngwow?Redirect=Log&logNo=50024736168
http://100.naver.com/100.nhn?docid=52227
http://blog.naver.com/tanato0?Redirect=Log&logNo=60046853296
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