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인간유방암세포인 MCF-7 세포주에서 카드뮴 및 비소의 독성유발 및 경감에 관한 연구

저작시기 2007.06 |등록일 2008.09.12 파일확장자어도비 PDF (pdf) | 77페이지 | 가격 1,000원

소개글

인간유방암세포인 MCF-7 세포주에서 카드뮴 및 비소의 독성유발 및 경감에 관한 연구를 한 논문으로 카드뮴과 비소가 인간유방암세포에서 어떠한 독성을 일으키며 어떠한 기작을 통하여 전달되는지 비교분석한 내용입니다.

목차

I. 서론
1.1. 카드뮴 노출 및 독성
1.2. 비소 노출 및 독성

II. 실험 재료 및 방법
2.1. 실험재료 및 처리
2.2. 세포주 및 세포배양
2.3. 세포사멸과 독성확인
2.3.1. 세포 생존율(MTT assay)
2.3.2. Apoptotic bodies 관찰(DAPI 염색)
2.3.3. Apoptotic cell deth 관찰(DNA fragmentation)
2.3.4. 세포주기 관찰 및 발현 변화
(1) Flow cytometic analysis(FACS analysis)
(2) 세포주기 발현 변화(Cell cycle expression ; Western analysis)17
2.4. 에스트로겐 수용체 경로를 통한 독성의 상관성 여부 확인
2.4.1. 중금속의 에스트로겐 활성 측정
: ERE-Luc reporter gene assa y
2.4.2. 에스트로겐 수용체 길항제의 카드뮴에 의한 ER 활성화 저해 확인19
2.4.3. 에스트로겐 수용체를 통한 독성 유발 규명
: ERα(-) 세포(MDA-MB-231)에 ERα 유전자 주입
2.4.4. 중금속 독성유발이 단백질 발현에 미치는 영향
2.4.5. 중금속 독성이 에스트로겐 수용체 함유 세포내 유전자 발현에 미치는
영향(cDNA microarray)
2.5. 항산화제에 의한 중금속 독성 경감에 관한 연구
2.5.1. 항산화제에 의한 세포 생존율(MTT assay)
2.5.2. 항산화제에 의한 단백질 발현에 미치는 영향
2.6. 통계분석

III. 결과
3.1. 세포사멸과 독성확인
3.2. 에스트로겐 수용체 경로를 통한 독성의 상관성 여부 확인
3.2.1. 중금속의 에스트로겐 활성 및 독성 유발 규명
3.2.2. 중금속 독성유발이 단백질 발현에 미치는 영향
3.2.3. 중금속 독성이 에스트로겐 수용체 함유 세포내 유전자 발현에 미치는
영향
3.3. 항산화제에 의한 중금속 독성 경감에 관한 연구

IV. 고찰

참고문헌
ABSTRACT

본문내용

카드뮴 및 비소는 다양한 세포와 장기에서 독성을 유발시킨다는 연구보고가 있으며,
인체와 동물에서 많은 독성연구가 진행 중에 있다. 그러나 카드뮴 및 비소에 대한
독성기전과 에스트로겐 수용체와의 상관성에 대해서는 아직까지 명확히 밝혀지지 않았다.
따라서 본 연구에서는 에스트로겐 수용체를 함유하는 세포인 MCF-7 세포를 이용하여
카드뮴 및 비소에 대한 독성영향 및 에스트로겐 수용체와의 상관성을 조사하고자 하였다.
카드뮴 및 비소에 대한 세포독성 평가를 위해 MCF-7 세포에 대한 IC 50 수치를 조사한
결과 카드뮴(55.54 μM)과 비소(123.02 μM)간의 차이를 나타냈으며, DAPI 염색, DNA
fragmentation 및 FACS 분석을 통해 세포사가 농도 의존적으로 증가 되는 것을
확인하였다. 카드뮴 및 비소 처리 시 ERE luciferase 활성을 측정한 결과 카드뮴이 50
μM 에서 에스트로겐 활성을 나타낸 것에 반하여, 비소의 경우는 활성을 나타내지 않았다.
카드뮴 및 비소에 의해 유도된 독성유발과 관련된 유전자 발현 변화를 조사한 결과 두
가지 중금속 모두에서 산화적 스트레스 작용 관련 유전자(heme oxygenase 1,
selenoprotein, thioredoxin 2, h eat shock protein, methllothione in) 발현이 공통적으로
증가하였다. 비교할만한 점은 비소를 처리한 경우에는 세포성장 및 신호전잘 관련
유전자(Insulin-like growth factor 1 receptor, WNT, ARNT, NFκB)가 증가하였다는
것이다.

참고 자료

없음
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