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[자연과학]PLD를 통한 PC 가수분해

저작시기 2007.05 |등록일 2007.05.30 한글파일한글 (hwp) | 5페이지 | 가격 500원

소개글

인지질 가수분해 효소인 PLD를 이용하여 PC를 가수분해 시켜 생성물인
PA (Phosphatidic Acid)를 TLC로 확인한다.

생화학실험 결과보고서 입니다. 인산가수분해 효소가 Phosphatidyl choline을 가수분해하는 것을 실험하고 관찰한 것 입니다.

목차

1.실험제목
2.실험목적
3.시약및기구
4.실험방법
5.실험결과
6.토의
7.감상

본문내용

4. 실험 목적
* 인지질 가수분해 효소인 PLD를 이용하여 PC를 가수분해 시켜 생성물인
PA (Phosphatidic Acid)를 TLC로 확인한다.

5.시약 및 기구
시약
• PLD, PC, buffer solution(CaCl2,acetic acid, 1M NaOH), ethylether, 전개용매 [chloroform : ethanol(methanol) : H2O = 65: 25:4], KMnO4 , 증류수


기구
• pH meter, 유리막대, 둥근바닥 플라스크, TLC판, 비커, 피펫, 모세관, hot plate, 온도계, 드라이기 , 알루미늄 호일

6.실험방법
(1) Buffer solution의 제조


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① 0.28805ml 아세트산에 0.55495g CaCl2를 혼합한다.
② 증류수를 조금 넣어 염화칼슘 조각을 유리막대로 찧어 완전히 부순다.
③ pH meter와 pH조절용 NaOH을 이용하여 pH 5.6을 만든다.
④ 증류수를 첨가하여 최종 부피 50ml를 만든다.

(2) PA의 확인

① Buffer solution과 PLD를 섞는다. (pH 변화 억제)
② PC를 50ml ethyl ether에 녹인다.
③ ①+②를 마그네틱바에 둥근 바닥 플라스크에 넣고 water bath로 가열하여 반응을 시작한다. =>40℃를 넘지 않게 한다.
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