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Gram Staining of LAB from Kimchi and Catalasing

저작시기 2007.01 |등록일 2007.05.19 한글파일한글 (hwp) | 9페이지 | 가격 500원

소개글

염료(dye)를 사용하여 세균의 형태, 배열 크기등의 관찰로 동정이 가능하다. Gram염색법은 세균의 Identification 의 한 방법으로 Gram(+)균과 Gram(-)균으로 나눌수 있다.
실험에서 균배양을 위해 사용한 MRS agar 배지는 젓산균 선택배지가 아니라 증식배지이기 때문에 Identification 이 필요하다.
Gram(+)균은 Crystal violet의 자주색이 탈색되지 않고, Gram(-)균은 알콜로 탈색처리후 safranin으로 염식을 시켜보면 분홍색으로 나타나는 특징을 가진다.
catalase 검사는 호기성균과 혐기성균을 구별하기 위한 방법으로 과산화수소 10배희석액을 흘려보내거품이 일어나면 양성, 거품이 없으면 음성으로 판별된다.

목차

1. Experimetal title
2. Principle
3. Materials & method
4. Remarks
5. Result
6. Discussion
7. reference

본문내용

1. Experimetal title :
Gram Staining of LAB from Kimchi and Catalasing
2. Principle
염료(dye)를 사용하여 세균의 형태, 배열 크기등의 관찰로 동정이 가능하다. Gram염색법은 세균의 Identification 의 한 방법으로 Gram(+)균과 Gram(-)균으로 나눌수 있다.
실험에서 균배양을 위해 사용한 MRS agar 배지는 젓산균 선택배지가 아니라 증식배지이기 때문에 Identification 이 필요하다.
Gram(+)균은 Crystal violet의 자주색이 탈색되지 않고, Gram(-)균은 알콜로 탈색처리후 safranin으로 염식을 시켜보면 분홍색으로 나타나는 특징을 가진다.
catalase 검사는 호기성균과 혐기성균을 구별하기 위한 방법으로 과산화수소 10배희석액을 흘려보내거품이 일어나면 양성, 거품이 없으면 음성으로 판별된다.
3. Materials & method
재료 :
1) Sample 균주가 배양된 Test tube 2개
2) Test tube rack.
3) 백금이, Alcohol Ramp
4) Carnet pincette.
5) Cover glass, Slide glass. 스포이드
6) Microscope
Reagents : Crystal violet, Lugol 액, Safranin 용액, Ethanol(95%), 증류수
Mathod(Gram 염색법)
①도말 -▶ ②고정 -▶ ③염색(crystal violet) -▶
④수세 -▶ ⑤건조 -▶ ⑥염색(iodine) -▶ ⑦수세 -▶
⑧건조 -▶ ⑨95%알콜로 탈색 -▶ 수세 -▶ 건조 -▶ 대비염색
①도말
루프를 알콜램프의 불꽃으로 소독한 다음 증류수로 식힌후에 슬라이드글라스에 증류수를 한방울 떨어뜨린다. 이후 도말을 하는데 도말시 주의할점은 루프로 균을 살짝 눈에 보이지 않을정도만 해야한다는 것이다. 많은 량을 도말시는 현미경관찰시 균들이 뭉쳐져 보이게 된다.
또 다른 주의점은 도말한 면을 잘 기억해야 한다. (세척시 지워질 경우가 생길수 있다.)
②고정
도말을 완료하면 건조시키는 작업을 거친다. 슬라이드를 잡고 알콜램프 불꽃위를 20~30번 정도 왕복시키면 수분들이 증발해서 고정된다.

참고 자료

미생물학 실험
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