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Small scale preparation of plasmid DNA

저작시기 2007.01 |등록일 2007.03.22 한글파일한컴오피스 (hwp) | 3페이지 | 가격 1,000원

소개글

Small scale preparation of plasmid DNA
alkaline lysis를 이해하고 recombinant DNA가 들어있는지 plasmid DNA로서 확인하단. plasmid 분리 방법을 익힌다.

목차

실험 이론
분리 방법
Alkaline lysis miniprep
plasmid DNA의 charge를 이용
Alkali lysis method 의 핵심 원리

본문내용

○ 실험 날짜 : `05. 11. 7

○ 실험 제목 : Small scale preparation of plasmid DNA(alkaline lysis에 의한 plasmid DNA 분리)

○ 실험 목적 : alkaline lysis를 이해하고 recombinant DNA가 들어있는지 plasmid DNA로서 확인하단. plasmid 분리 방법을 익힌다.

○ 실험 이론 :

∙플라스미드의 정제는 total cell DNA를 일반적인 분리방법과 같다. 플라스미드를 지니는 세포를 액체배지에서 배양하여 수확하고 cell extract를 하면 된다. extract는 단백질을 제거하고 에탄올침전으로 DNA를 응축시킬 수 있다. 그러나 total cell DNA 분리와 plasmid 정제와는 중요한 차이점이 있다. plasmid 분리는 일반적으로 많은 양의 chromosomal DNA로부터 분리하여야 한다. 플라스미드 분리방법은 plasmid DNA와 bacterial DNA의 물리적인 차이점에 의해 분리된다. 가장 큰 플라스미드의 길이는 E. coli 의 염색체 길이에 8%밖에 되지 않으며 대부분이 작다. 플라스미드와 bacteria DNA의 구조에 차이로부터 분리하는 방법이 있다. 플라스미드와 염색체는 circular인데 염색체는 extract시 circular에서 linear조각으로 깨어지며 플라스미드에는 circular으로서 변화가 없다.
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