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[a+]- 단백질체학

저작시기 2007.01 |등록일 2007.03.12 한글파일한컴오피스 (hwp) | 4페이지 | 가격 500원

소개글

열심히 했습니다 ㅎ
자세한 설명은 본문내용보기&목차로 대신하겠습니다 ㅎㅎ
부담없이 보세요 ㅎ

목차

1. Bradford assay
2. Lowry assay
3. BCA assay

본문내용

1. Bradford assay

○ Coomassie Blue G 염색약이 단백질과 결합함으로써 생기는 파장의 변화를 측정하는 것.

○ 장점 : 정량시간이 매우 빠르고 간단하다.

○ 단점 : 단백질이 아닌 detergent나 지방 등에 의해 간섭을 많이 받는다.
단백질마다 Coomassie Bleu G 염색약과 결합하는 정도가 조금씩 다를 수 있다.

○ 방법
- Bradford reagent를 1:5의 비율로 증류수에 희석한다. (working solution)
- BSA standard를 준비한다.
(1mg, 2mg, 4mg, 6mg, 8mg, 10mg, 12mg, 14mg, 16mg, 18mg, 20mg)
- 1ml Bradford reagent working solution에 BSA standard를 넣어주고 5분간 상온에 방치한 후 spectrophotometer를 이용하여 595nm에서 흡광도를 측정한다.
- 최신 spectrophotometer는 자체적으로 regression curve를 그려주고 sample의 단백질량을 찾아주는 프로그램이 내장되어 있으나 옛 버전의 경우에는 계산기를 이용하여 linear regression curve에서 기울기와 y절편을 직접 계산해야 한다.
- 시료 단백질을 같은 방법으로 처리하여 위에서 얻은 standard curve로부터 단백질량을 도출 한다.



2. Lowry assay

○ 단백질 정량 분석 방법.

○ 5㎍/㎖정도의 적은 양으로도 정량이 가능.

○ 단백질 정제에 있어 단백질 농도 측정에 널리 쓰임.

○ 분석 가능 범위 : 5㎍/㎖~100㎍/㎖

참고 자료

없음
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