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[자연과학]transfection

저작시기 2007.01 |등록일 2007.03.09 한글파일한컴오피스 (hwp) | 7페이지 | 가격 1,500원

소개글

trasfection의 전반적인 이론과 각 실험방법의 장단점을 모아둔 것입니다..

목차

I. Transfection의 정의
II. Transfection의 종류
III. Transfection의 방법
IV. 결론

본문내용

I. Transfection의 정의

Transfection이란 외래의 DNA를 eukarayotic cell에 주입하는 것을 의미하는 것으로, 일반적으로 cell에 일시적으로 구멍을 만들어 외래의 DNA가 도입될 수 있게 한다. 주입되는 DNA는 주로 supercoiled plasma DNA이고 siRNA가 도입되기도 한다.
- Competent cell : 외래의 DNA가 host cell로 주입되는 데에는 많은 어려움이 있다. 따라서 transfection 전에 host cell에 처리를 가하여 외래 DNA를 더 잘 받아들일 수 있는 상태로 만들어 준다. Cell의 세포막은 대개 hydrophobic한 성질 때문에 negative charge를 띤 DNA가 cell 내로 자연적으로 들어가기 어렵다. 따라서 Ca2+(CaCl2)등의 chemical을 고농도로 처리하여 세포막을 유연케 만들어 transfection이 쉽게 만든다. 이 상태의 cell을 competent cell이라고 한다.


II. Transfection의 종류

1. 도입 DNA 발현 양상에 따라

1) Stable transfection
Stable transfection에서는 도입된 gene이 생식의 과정동안에도 보존된다. 즉, 달 세포도 도입된 gene을 소유하게 된다. cell 내로 주입된 DNA는 핵 안으로 들어가고 완벽하게 host cell의 DNA내로 주입된다. 정상적인 환경 아래서는 완벽한 stable transfection은 힘들다. gene이 효과적으로 도입된 cell을 선택하기 위해서는 특정 toxin등에 대해 저항성을 가지는 gene을 co-transfection하는 것이 좋다. Stable transfection은 gene therapy의 핵심 기술이다.

2) Transient transfection
Transfection의 과정에서 외래 DNA가 eukarayotic cell 내로 주입되게 된다. 실험적으로 이러한 cell에 주입된 gene이 오로지 짧은 시간동안만

참고 자료

http://www.iscid.org/encyclopedia/Transfection
http://www.iscid.org/encyclopedia/siRNA_Transfection
http://www.iscid.org/encyclopedia/Cell_Transfection
http://www.qbiogene.com/products/transfection/app-sirna.shtml
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