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[공학]Protein anlysis

저작시기 2006.01 |등록일 2006.12.13 한글파일한글 (hwp) | 6페이지 | 가격 600원

목차

1. 실험 목적
2. 원리 및 배경
3. 실험 기구 및 시약
4. 실험 방법
5. 실험 참고 사항

본문내용

1. 실험 목적
단백질의 비색정량법으로 가장 많이 사용되고 있는 것이 Lowry법과 Biuret법이며 감도는 각각 1~200㎍, 0.25~200mg 으로 Lowry법이 Biuret반응보다 휠씬 좋다. Biuret반응은 Biuret이 alkali성 용액중에서 ion과 반응하여 보라색으로 되는 것에서 유래한 것이며 peptide 결합의 존재에 기인되는 반응이기 때문에 어떠한 종류의 단백질에 대해서도 정색반응을 나타내므로 정량에 응용되고 있습니다. Lowry등이 고안한 Lowry 정량분석법은 용액에 있는 단백질뿐만 아니라 건조된 시료에도 이용될 수 있습니다. 특히 이 정량방법은 5㎍/ml 정도의 단백질 양을 정량할수 있는 대단히 민감한 방법이어서 널리 쓰이고 있습니다. 이 Lowry방법에서 사용하는 Folin-ciocalteau 시약에 의한 발색은 Biuret실험에서와 마찬가지로 단백질과 알칼리성 구리와의 반응과 포스포몰리브덴산-포스포텅스텐산 염들이 단백질에 있는 티로신과 트립토판 등에 의한 환원반응으로 생깁니다. 색의 세기는 이러한 물질들의 방향족 아미노산의 존재량에 의존합니다. 따라서 이 두 아미노산의 함량은 단백질의 종류에 따라 상당히 다르므로 1mg 의 단백질에 대한 색의 세기가 다를 수 있습니다. 그럼에도 불구하고 이 방법은 미량의 단백질을 효과적으로 측정하는 것이 가능하므로 단백질을 정제하는 과정에 있어서 단백질의 함량변화를 측정하는 데는 매우 유용한 방법입니다.

본 실험에서는 Lowry법의 원리를 이해하고 이 방법을 이용하여 단백질을 정량한다.

2. 원리 및 배경

단백질
모든 생물의 몸을 구성하는 고분자 유기물.
수많은 아미노산(amino acid)의 연결체이다. 천연아미노산에는 20종류가 있는데, 이 아미노산들이 펩티드 결합이라고 하는 화학결합으로 서로 연결되어 길게 측쇄형으로 된 것을 폴리펩티드(polypeptide)라고 한다. 단백질과 폴리펩티드는 같은 말이지만, 보통 분자량이 비교적 작으면 폴리펩티드라 하고, 분자량이 매우 크면 단백질이라고 한다. 그러나 이러한 구별은 엄격한 것이 아니어서 두 가지를 혼용하여 쓴다.

참고 자료

blog.korea.ac.kr/servlet/DownLoad/ 단백질정량법.ppt?attachmentId=3401
http://che.konyang.ac.kr/course/expro2/%EB%B6%84%EA%B4%91%ED%95%99%EC%8B%A4%ED%97%98/UVVis/%EC%8B%A4%ED%97%98%EB%B0%A9%EB%B2%95.htm
http://www.sigmaaldrich.com/Area_of_Interest/Life_Science/Proteomics_and_Protein_Expr_/Protein_Analysis.html
-naver 지식 in & 백과사전
-교재
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