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평가점수C

[식품화학실험]단백질 전기영동

저작시기 2006.06 |등록일 2006.07.19 한글파일한글 (hwp) | 7페이지 | 가격 800원

소개글

안녕하세요 식품공학과 4학년 학생입니다.
이번 1학기때 작성한 실험보고서입니다.
7종의 sample(skim milk, whey, casein등)을 두종류의 전기영동법을 사용하여 분리하는 실험이었고 두장의 실험결과 사진이 첨부되어있습니다. 상당히 정성들여 쓴 보고서이고 A+받은 과목입니다.
전기영동 실험 보고서를 쓰실 때 많은 도움이 될 것입니다.

목차

1.Title
2.Principle
3.Material, Reagents & Apparatus
4.Procedure
5.Results
6.Discussion

본문내용

Title 단백질 전기영동

Principle
전하를 갖는 물질을 직류전기장에 놓으면 그 물질의 전하, 분자의 크기 및 모양 등에 따라 각각 특유의 이동을 한다. 이와 같은 거동을 전기영동(electrophoresis)이라 하고, 이동정도의 차이에 의하여 물질의 분리 또는 순도를 검정하는 방법을 전기영동법이라고 한다. Sodium dodecyl sulfate-Polyacrylamide gel electrophoresis(SDS-PAGE)는 단백질 및 그 소단위체(sub unit)를 분리, 정량, 비교하고 특성을 규명하는데 가장 널리 이용되는 방법으로 값이 저렴하고, 재현성이 높으며, 속도가 빠른 장점을 가지고 있다. 이 방법은 분자량에 따라 단백질을 분리한다. 단백질은 2-mercaptoethanol과 sodium dodecyl(lauryl) sulfate(SDS)의 존재하에 100℃까지 가열하므로 그 소단위체로 분리된다. 2-mercaptoethanol은 peptide사슬간의 disulfide의 결합을 환원시키며, SDS는 일정한 질량비(1.4g SDS/ 1g polypeptide)로 polypeptide에 결합함으로써 단백질은 rod-like분자로 재구성된다. 그 rod의 지름은 약 18Å으로 일정한 반면 SDS-polypeptide 복합체의 길이는 polypeptide의 분자량에 비례한다. 그 결합된 SDS 분자는 강력한 부적 전하를 갖게 하여 polypeptide 자체의 전하를 효과적으로 없애게 한다. 몇 가지 예외를 제외하고, SDS-polypeptide 복합체는 동일한 전하/질량비를 가지므로 polyacrylamide gel을 통과하는 동안 polypeptide의 분자량에 따라 이동하게 된다. 그리고 분자량 marker의 이동거리와 비교함으로써 각 polypeptide의 분자량을 계산할 수 있으며, 상대적인 염색강도를 비교함으로써 polypeptide의 상대적인 양을 추정할 수 있다.

Material, Reagents & Apparatus

※ sample(각 5㎕) : skim milk
whey
casein
αs-casein(1/10, 1/100)
β-casein(1/10, 1/100)

1. SDS-PAGE
① Separating gel (15% gel 조제)
․H2O 2.3ml
․30% Acrylamide mix 5.0ml
․1.5M Tris (pH 8.8) 2.5ml
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