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[생화학]단백질 정량법

저작시기 2006.03 |등록일 2006.06.22 한글파일한글 (hwp) | 10페이지 | 가격 2,000원

소개글

단백질 정량법 총 7가지를 각각 특징, 원리, 장점, 단점, 준비물, Protocol 순서대로 일목요연하게 정리해놓았습니다. 리포트에서 좋은 점수를 받은 만큼 유용한 자료로 이용하셨으면 좋겠습니다.

목차

1. Biuret법
2. BCA법
3. 분광학적 정량법(UV법)
4. Kjeldahl법
5. Lowry법
6. 전기영동법
7. Bradford법
8. 회귀방정식
9. 참고 문헌


본문내용

1. Biuret법
1) 특징
가장 고전적인 비색 정량법
2) 원리
시료에 CuSO4 또는 rochelle 염과 CuSO4를 가하여 540~560nm로 흡광도를 측정하거나, CuSO4와 NaOH의 혼액을 시료에 혼합하여 263nm, 310nm의 흡광도를 측정함으로써 단백질을 정량하는 방법
3) 장점
- 단백질의 종류에 따라 발색율의 변동이 작다.
- 시약의 조제, 조작이 간단하다.
- 모든 단백질에 대해서 재현성이 좋다.
4) 단점
- 감도가 나쁘다.
- 다량의 당류가 공존되거나 proline을 함유한 peptide에서는 정색이 나빠 낮은 값을 나타낸다.
- 유사한 파장의 공존 물질에도 방해된다.
- 비교적 많은 양(1 내지 20mg)의 단백질을 정량하는 데 쓰이는 방법이다.
5) 준비물
- Biuret시약(CuSO4∙5H2O, Sodium potassium citrate, D.W. 교반하며 10% NaOH, KI를 넣어 실온에서 보존한다.)
- 분광광도계
- 표준물질(20mg/ml BSA)
6) protocol
a. 표준물질, 그리고 시료 각 100ul를 유리시험관에 취하고(각각 2개씩), Biuret 시약을 1ml 가하여 교반기로 교반한다.
b. 실온에서 20~30분 이상 정치한다.
c. 540nm에서의 흡광도를 측정한다.

참고 자료

- 최신 생화학, 김을상 外 6명, 신광문화사
- 단백질 실험노트(上), 김승호, 월드사이언스
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