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[자연과학]TLC를 이용한 시료의 분리

저작시기 2006.04 |등록일 2006.05.25 한글파일한컴오피스 (hwp) | 19페이지 | 가격 700원

소개글

10점 만점에 10점 받은 보고서입니다..^^

목차

1. 실험목적
2. 실험 기구 및 시약
3. 실험 원리
4. 실험 방법
5. 결과 및 고찰
6. 관련 내용

본문내용

1. 실험목적

박막크로마토그래피(TLC: Thin Layer Chromatography) 방법으로 아미노산(threonine, isoleucine, histidine)을 전개용매의 극성차이에 따라 분리하여 미지의 시료가 무엇인지 알아내고 크로마토그래피의 원리에 대해서 이해해보자.


2. 실험 기구 및 시약

-시료: threonine, isoleucine, histidine, 미지의 아미노산 시료
(각 10mg을 1 ml증류수로 녹임 (1%(w/v))
-전개용매: acetonitrile / 0.1M ammonium acetate
(60 : 40)
-ninhydrin 분무제(발색제) : 0.6g ninhydrin / 200ml n-butanol
(빛에 약하기 때문에, 외부 빛으로부터 차단되게 보관, 사용한다).
-종이크로마토그래피용 종이, 연필, 자, 모세관 등

3. 실험 원리

물이나 알코올과 같은 용매에 색소와 같은 물질들이 녹아 거름종이나 백묵과 같은 고정상을 통과할 때 물질에 따라 고정상에 흡착되는 속도가 다르다는 성질을 이용한 것이 크로마토그래피의 기본 원리이다. 분리는 정지상에 이동상을 흘려주면서 이루어진다. 이 실험에서는 특수 처리된 종이(종이크로마토그래피용 종이)에 흡착되어 있는 물이 정지상으로 쓰이고, 알코올과 물의 혼합 용액이 이동상이 된다. 분리되어질 아미노산들은 정지상과 이동상에 서로 다르게 분배되기 때문에 이동상이 종이를 따라 전개될 때 서로 다른 속도로 움직이게 된다. 이 때, 고정상에 의한 흡착력이 큰 성분일수록 움직이지 않고 고정상에 흡착되어 있는 분자들의 비율이 크다. 그리고 흡착력이 약한 성분일수록 이동하는 용매에 포함된 분자들이 많아 용매와 함께 잘 올라간다. 그러므로 고정상에 흡착력이 약한 성분일수록 더 빠른 속도로 고정상을 통과하게 되므로 이동 속도가 성분 물질마다 달라 혼합물이 분리된다. 크로마토그래피법의 장점은 성질이 비슷한 물질이 섞여 있거나 그 섞여 있는 양이 적을 때에 효과적으로 분리할 수 있으며, 조작이 간단하고, 소요 시간이 짧다는 것이다. 크로마토그래피는 아미노산 지방 금속 이온 혈액 소화 효소 비타민 당분 등 상당히 만은 종류의 물질들을 분리하거나 확인하는데 사용된다.

참고 자료

없음
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