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평가점수B

Gel Filtration을 이용한 Molecular weight 결정

저작시기 2004.10 |등록일 2005.01.09 | 최종수정일 2014.09.30 한글파일한컴오피스 (hwp) | 10페이지 | 가격 2,500원

목차

1. 실험제목

2. 실험일자

3. 제출자 및 공동실험자

4. 목적

5. 원리

6. 시약 및 기자재

7. 방법

8. 결과

9. 고찰

본문내용

실험에 사용한 column은 흰색이었는데 protein을 loading 시키는 과정에서 푸른색과 붉은색이 보였는데 이것은 각각 Blue dextrin과 Cytochrome C가 용출되었기 때문이다. 이것을 토대로 각각의 loading 시킨 protein이 다른 속도로 column을 통과해 용출됨을 알 수 있었다. 결과 그래프를 보면 4개의 peak가 잘 나타났고, Cytochrome C를 보기위해 측정한 480㎚의 흡광도에서도 Cytochrome C를 확인할 수 있었다. 일반적으로 resin의 resolution을 높이기 위해서는 길이와 반경의 비가 50:1이상이 되어야 하는데 실험에서 사용한 column은 길이가 너무 짧았기 때문에 아무래도 미지시료의 MW를 알아내는데 한계가 있었던 것 같다. 미지시료의 peak가 19번째 fraction에서 나온 것을 토대로 MW를 추측해 보면, BSA와 MW가 비슷할 것이라 생각했는데 그래프에서도 보여지듯이 미지시료를 loading 하기전에 시행한 standard proteins의 잔재가 남아서 아무래도 실제 fraction number는 더 작았을 것으로 여겨진다. 이것이 오차의 원인이 될 수 있다고 본다. 또한 resin을 통과할 때 수평이 아니라 기울어져서 전개되었다면 protein들이 완전히 분리 되지 않았을 수도 있다.미지시료의 MW결정은 K라는 분배계수가 특정 protein에 대하여 매우 specific한 것을 토대로 이미 Weight을 알고 있는 Protein을 사용해서 구했다.

참고 자료

생화학 (형설출판사, 김명순 1999.)
생화학 (請文閣 Frank B. Armstrong 원서명 : Biochemistry 강신원. 1992)
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