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[생물학] [분자유전]cDNA library

등록일 2004.06.25 한글파일한컴오피스 (hwp) | 14페이지 | 가격 1,500원

소개글

상세한 discussion.

목차

Ⅰ. Introduction
Ⅱ. Result
Ⅲ. Discussion
Ⅳ. Reference

본문내용

cDNA(상보성 DNA, 또는 복사본 DNA, complementary DNA, 혹은 copy DNA)는 mRNA와 같은 RNA의 DNA 복사본이다. 우리는 가끔 일정 시간에 특정한 형태의 세포에 존재하는 mRNA를 가능한 한 많이 가지는 cDNA library를 만드는 경우가 있다. 이러한 library에는 각기 다른 클론이 수만 가지 들어있다. 어떤 경우에는 한 개의 특별한 mRNA로부터 만들어진 한 종류의 cDNA만을 만들 수도 있다. 그러므로 우리가 이용하고자 하는 방법은 어떤 목적이냐에 따라 다를 수 있다.
cDNA library를 만들고자 하면, 틈새번역(nick translation)이라는 방법을 이용할 수 있다. 틈새 번역반응의 원리는 동시에 틈(단사DNA절단) 앞쪽의 DNA를 제거하고 틈새 바로 뒤에 DNA를 합성하는 것이다. 그에 따른 순 결과는 틈이 5′에서 3′방향으로 이동하는 것이다. 이 과정에는 5′→ 3′핵산외부가수분해효소 기능을 가지고 있어 틈새 앞쪽의 DNA를 제거하면서 움직이는 대장균DNA 중합효소I을 이용한다.
cDNA 클로닝 방법의 핵심은 mRNA 주형을 역전사효소(reverse transcriptase)를 이용하여 cDNA로 전환시키는 것이다. 역전사효소도 다른 DNA 합성효소와 마찬가지로 프라이머가 없으면 DNA 합성을 개시할 수 없다. 이를 해결하기 위하여, 대부분의 진핵세포 mRNA가 가지고 있는 poly(A) 꼬리를 이용하여 올리고(dT)를 프라이머로 이용한다.

참고 자료

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