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[생화학실험] 단백질 정량법/Spetrophotometer/SDS-PAGE

등록일 2004.05.27 한글파일한글 (hwp) | 9페이지 | 가격 1,000원

목차

1.단백질의 정량법
(1)뷰렛법
(2)Lowry법
(3)Kjeldahl법
(4)자외선 분광도법
(5)전기영동법
(6)방사선 동위원소법

2.Spetrophotometer의 원리
(1)구조
(2)흡광도
(3)빛의 파장

3.SDS-PAGE
(1)원리
(2)실험방법

본문내용

✘단백질의 정량법✘

단백질을 정량하는 방법에는 뷰렛법, Lowry법, Kjeldahl법, 자외선 분광도법, 전기영동법, 방사선 동위원소법 등이 있다.

(1) 뷰렛법
두 개 이상의 펩티드 결합을 가지고 있는 화합물들은 알칼리성 용액에서 묽은 황산구리로 처리하면 자주색을 띠는 물질을 생성한다. 색깔은 구리 원자와 두 개의 펩티드 사슬에서 오는 네 개의 질소원자들 사이에서 배위화합물이 형성됨으로써 생기는 것으로 생각되고 있다. 뷰렛 시험은 모든 단백질에 대해서 재현성이 꽤 좋으나 비교적 많은 양(1~20mg)의 단백질을 정량하는 데 쓰이는 방법이다
비우렛은 알카리성 CuSO₄와 반응하여 보라색의 착화합물을 만든다. 두 개 이상의 펩티드 결합을 화합물도 마찬가지로 유사한 착화합물을 만들며 단백질의 경우에는 청자색 또는 적자색을 나타낸다. 이 원리를 이용하여 단백질을 정량한다. 보통 이 방법으로는 약 1~10mg의 단백질을 정량할 수 있지만, 미량 뷰렛법은 약 0.25~2.0mg까지 정량할 수 있는 감도를 가진다. 착화합물의 색은 1~2시간동안은 안정하지만, 그 이상의 시간에서는 점점 색도가 증가한다.

참고 자료

 http://opendic.naver.com/100/entry.php?entry_id=9783
 http://kin.naver.com/browse/db_detail.php?dir_id=1102&docid=214093
 생화학 ( Albert I. Lehninger , 1984)
 실험생화학 (한국생화학회, 19861 탐구당)
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