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[단백질]단백질을 이용한 실험

등록일 2004.05.09 한글파일한글 (hwp) | 9페이지 | 가격 500원

소개글

단백질과 관련된 가장 기초적이고 기본적인 실험들에 관한 설명입니다.

목차

1. Buffer(완충액)의 선택
2. 단백질의 안정화
3. 단백질 정량법
4. 단백질의 추출법
5. 단백질의 가용화법

본문내용

1. Buffer(완충액)의 선택

buffer는 수소이온농도를 일정하게 유지하기 위하여 적절한 염류를 녹여 만든 수용액이며, 단백질을 용액상태에서 취급할 때에 주로 buffer를 사용하게 되는데, 단백질 용액의 pH를 조절하는 목적은 단백질의 안정화, 효소 등의 활성측정, 각종 크로마토그래피의 조건설정 등 여러 가지가 있으므로 목적에 맞추어 buffer를 선택할 필요가 있다. buffer를 선택할 때에는 사용하는 pH가 가장 중요한 조건이다. 완충제가 가지고 있는 완충능력은 pKa가 최대로 되며 여기서부터 벌어지는 정도에 따라 낮아지게 되기 때문에 사용하는 pH에 따라 완충제의 종류는 제한된다. 일반적으로 pKa±0.5 정도의 범위에서 유효한 완충작용이 얻어진다.

□. Buffer의 종류
○ Glycine buffer (pKa=2.35)
낮은 pH영역에서 단백질을 취급하는 경우는 거의 없지만, Protein A 혹은 항원을 고정화시킨 담체를
사용하여 항체를 정제하는 겨우는 용출액으로서 사용된다.
○ Acetate buffer (pKa=4.76)
○ MOPS buffer : 3-(N-mopholino) propanesulfonic acid (pKa=7.15)

참고 자료

Masato okada 저"단백질실험노트 상" 월드사이언스
Daniel M. Bollag, "Protein methods"
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